基因工程的工具
板书
TIP
利用限制酶将 DNA 断开后，其中用于碱基配对的氢键不用管，也会自动断开
TIP
- 限制酶能否切某 DNA，就看 DNA 是否有能对应识别的序列。
- 比如酶A 能识别 GAATTC 的序列，且能切割 G - AATTC 处的位点
- 可以发现，限制酶能识别的DNA序列，其碱基排列对双链来说都是回文。
- 酶B能切割GAATTC 序列，因为这个序列包含了 AATT。
- 但是酶 A 不一定能切割 AATT 序列。如果AATT 两边的碱基刚好能与 AATT 组成 GAATTC ，那么就可以切割；否则不可以。
TIP
- 一开始基因 A 有两个限制酶 的酶切位点 P
- 100；300；250 代表碱基对的对数
- 现在一个酶切位点的 GAATTC 序列发生基因突变，变成 GAAATC，那么限制酶就不能识别这个位点了。
TIP
- A/B/C 是 3 种限制酶。
- 酶A能切的序列，酶B也能切，反过来不一定
- 酶 C 能切的序列，酶B也能切，反过来不一定
- 酶 A/B/C 切割后产生的两组黏性末端，能够任意两两配对连接。如图所示。
- 同尾酶，酶切后产生的黏性末端都是相同的。
- 比如上图中的黏性末端都是 -CTAG
TIP
- 载体要满足的条件：
- 有若干酶切位点，便于切开然后与目的基因连接
- 有标记基因，便于人们知道目的基因是否进入受体细胞并起作用了。因为我们不能通过肉眼看到目的基因是否进入了受体细胞。
课件
例题
1
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标答
2
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标答
3
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TIP
- 如果两个同尾酶切割后的黏性末端相同，但是识别序列不同，那么重组质粒就不能被这两种限制酶切割。只能被与黏性末端相同序列的限制酶切割。
标答
